Tema: Manejo de la técnica
Western Blot. Determinaciones relacionadas con obesidad y diabetes.
Objetivo: poner a punto la
técnica WB para la detección de PPARγ.
Muestra: Muestras de
tejido adiposo subcutaneo de ratas Zucker (fa/fa), muestras de tejido
adiposo perirrenal de ratas Wistar alimentadas con una dieta obesogénica
Resultados: Las
modificaciones realizadas al protocolo para Western Blot que se utilizaba en el
laboratorio permiten la inmunodetección y cuantificación del PPARγ en las
muestras que se emplearon en este trabajo.
Conclusiones
Utilizar geles de 1 mm de
grosor, aumentar el tiempo de transferencia de 30 a 40 minutos y emplear el
mild-stripping en lugar del hard-stripping) han demostrado su validez para la
inmunodetección y cuantificación del PPARγ en modelos de obesidad genética y
dietética en ratas.
Fuente:
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