ANÁLISIS DEL PCR PARA EL ESTUDIO EN LA DIABETES MELLITUS

Tema: Estudio génico (OPG, RANKL, Runx2 y receptores AGE) en cultivos de osteoblastos humanos de pacientes con diabetes mellitus tipo 2 y fractura de cadera. Influencia de los niveles de glucosa y AGEs.

Objetivo:Valorar si las variaciones de glucosa circulante generan alteraciones en la expresión de genes relacionados con la diferenciación y actividad osteoblástica (OPG, RANKL, Runx2 y AGER) en el cultivo primario de osteoblastos (hOB).

Muestra: Cultivos primarios de osteoblastos humanos (hOB) a partir de hueso trabecular

Tipo de ácido nucleico: ARNm genómico

Extracción de ADN

Lisis: Kit High Pure RNA Isolation

Separación: Kit High Pure RNA Isolation

Purificación:  Kit High Pure RNA Isolation

Gen a amplificar: OPG, RANKL, Runx2 y AGER

Tipo de PCR: PCR en tiempo real

Pasos

Desnaturalización

Hibridación 

Elongación

Visualización: EFO

Fuente:

Miranda Díaz C1, Giner García M1,2, Montoya García MJ2, Vázquez Gámez MA2, Moruno R2, Miranda García MJ1, Pérez Cano R1,2. Rev Osteoporos Metab Miner. actualizado el 2012( citado el 24 de Nov 2017); 4 (1): 7-14. disponible en :

  http://revistadeosteoporosisymetabolismomineral.com/romm17/2017/07/11/estudio-genico-opg-rankl-runx2-y-receptores-age-en-cultivos-de-osteoblastos-humanos-de-pacientes-con-diabetes-mellitus-tipo-2-y-fractura-de-cadera-influencia-de-los-niveles-de-glucosa-y-ages/